流式细胞分选技术始终是科研实验解析细胞异质性、挖掘疾病机制的关键工具。然而,传统的分选设备长期面临纯度与得率难以兼顾的困境,而高纯度模式易导致目标细胞丢失,高得率模式则可能混入非目标细胞。贝克曼库尔特生命科学推出的CytoFLEX SRT流式细胞分选仪,凭借其设备的双域精准DCD技术应用成功打破了这一技术瓶颈,实现了分选纯度与得率的双重突破,为单细胞测序、肿瘤免疫研究、干细胞治疗等领域提供了有效的解决方案。
流式细胞分选仪的技术革新:双域精准DCD重构分选逻辑
传统DCD技术依赖微球估算液滴延迟,但细胞在液流中的动态行为远比微球复杂——靠近鞘液中心轴的细胞加速更快,而边缘细胞则因流体阻力滞后。这种差异导致传统方法在分选稀有细胞时,纯度与得率往往呈现“跷跷板效应”。CytoFLEX SRT创新性地引入双域精准DCD技术,通过时间域测量+空间域分析的双重校准,实现液滴延迟的毫秒级精准控制:
1.时间域测量:利用QC微球从激光触发点到专用激光点的行进时间,建立基础液滴延迟模型;
2.空间域分析:通过高速摄像技术捕捉液滴断裂点(BOP)的动态变化,结合图像算法计算微球经过专用激光点到BOP的剩余时间。
双域数据融合后,系统可自动生成最优DCD值,确保目标细胞始终位于液滴中心50%的“安全区”,显著降低空液滴分选率。实验数据显示,在分选GFP高表达HeLa细胞时,采用双域精准DCD技术的CytoFLEX SRT将得率从传统方法的82%提升至93%,纯度仍保持99.2%以上。
CytoFLEX SRT流式细胞分选仪的实验应用:
1. 单细胞基因组学:提升孔板分选效率:在单细胞测序中,空液滴或污染液滴会导致孔板浪费与数据噪声。CytoFLEX SRT通过0.5滴分选信封(仅分选液滴中心50%区域)与分选保护带(自动中止相邻液滴边缘的污染物)技术,将96孔板分选得孔率从传统设备的78%提升至95%。某肿瘤免疫研究团队在分选CD8+ TIL细胞时,采用CytoFLEX SRT后,单细胞测序的可用数据量增加40%,显著缩短了肿瘤新抗原筛选周期。
2. 稀有细胞分选:兼顾灵敏度与效率:针对循环肿瘤细胞(CTC)等低丰度细胞,CytoFLEX SRT的四路独立液流与复杂分选逻辑功能可同时设置多级分选策略。例如,在分选乳腺癌患者外周血中的CTC时,仪器先通过前向散射光(FSC)与侧向散射光(SSC)排除碎片与死细胞,再利用多色荧光标记(如EpCAM+/CD45-)锁定目标细胞,最终通过双域精准DCD技术实现高纯度捕获。临床验证显示,该技术将CTC分选假阳性率从12%降至3%,为液体活检提供了更可靠的数据源。
3. 自动化流程:降低人为误差:设备内置自动化液流维持系统与气泡检测模块,可实时调整鞘液压力与液滴频率。在连续分选12小时的稳定性测试中,仪器未出现液流偏移或分选效率下降,而传统设备在相同条件下需每2小时手动校准一次。此外,其补偿库功能可自动生成多色分选方案,将实验准备时间从传统方法的4小时缩短至30分钟。
此外,流式细胞分选仪的技术突破不仅限于基础研究。在CAR-T细胞治疗领域,其高纯度分选能力可确保T细胞亚群的精准富集,降低脱靶效应风险;在药物研发中,通过分选药物敏感/耐药细胞株,可加速抗肿瘤药物的筛选进程。
综上,CytoFLEX SRT流式细胞分选仪的问世,标志着流式技术从“纯度优先”或“得率优先”的单维竞争,迈入“纯度与得率协同优化”的新纪元。其双域精准DCD技术不仅解决了长期困扰科研人员的分选难题,更通过自动化、智能化的设计,让生命科学研究者得以聚焦核心科学问题。在单细胞时代,CytoFLEX SRT正以创新之力,推动生物医学研究迈向更高精度与效率的未来。